在合成類二十烷酸的過程中，從磷酸酯類合成釋放花生四烯酸是一個限速步驟。內毒素刺激細胞合成特殊的磷酸酯類，包括磷脂酰膽堿（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）和磷脂酰肌醇（PI），其主要途徑至少有兩條。

磷脂經磷脂酶A2（PLA2）作用直接釋放出花生四烯酸。多種PLA2的同工酶優先催化PC或PE。花生四烯酸主要來源于PC和PE，因為它們是各種磷脂中構成含量最大的。另一條途徑為磷酸酯酶C裂解4，5-二磷脂酰肌醇為1，4，5-三磷酸肌醇和1，2-二酰甘油，它們兩者均為細胞內的第二信使。二酰甘油酶使花生四烯酸從二酰甘油中釋放出來。

脂氧化酶途徑或環氧化酶途徑以何者激活為主，可能取決于某一特殊刺激引發的磷酸酯類底物的情況。家鼠巨噬細胞受刺激后激活脂氧化酶途徑，顯示它對磷酸酯酶C/二酰甘油酶途徑的依賴。但是，內毒素或醋酸豆蔻酸佛波酯（PMA）誘導的前列腺素合成并不依賴于磷酸酯酶C/二酰甘油酶途徑。另一種存在于人類多形核中性粒細胞的激動劑即血小板活化因子，它激活鈣離子依賴的PLA2，進而作用于磷脂底物。

大鼠腹膜巨噬細胞受內毒素刺激使14C標記的花生四烯酸從磷脂酰膽堿/磷脂酰乙醇胺/磷脂酰肌醇大量釋出。磷脂酰膽堿在被利用的磷酸酯類中占主導地位，這一事實表明內毒素是直接或間接刺激PLA2合成的。Cavaillon和Haeffuer等早就推測細胞表面存在內毒素受體，但是將細胞外內毒素與細胞內類二十烷酸合成連接起來的機制始終未獲闡明。這種可能存在的受體調控著鳥嘌呤核苷酸調節蛋白，也調控著蛋白激酶C的活化過程以及蛋白質的重新合成。